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簡(jiǎn)要描述：產(chǎn)品可保大鼠陰道壁成纖維細胞的生長(cháng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠陰道壁成纖維細胞生長(cháng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于大鼠陰道壁成纖維細胞的體外培養。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用，不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。
產(chǎn)品型號：GOY-01X1426 廠(chǎng)商性質(zhì)：科研更新時(shí)間：2023-10-24 00:00:00訪(fǎng) 問(wèn) 量：302產(chǎn)品分類(lèi)
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產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠陰道壁成纖維細胞
貨號：GOY-01X1426
分類(lèi)：原代細胞
2.組織來(lái)源：陰道組織
3.產(chǎn)品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡(jiǎn)介：大鼠陰道壁成纖維細胞分離自陰道組織；陰道位于膀胱、尿道和直腸之間，是一個(gè)富有彈性的管狀器官。它在人類(lèi)生殖過(guò)程中具有多種生理功能，是連接子宮與外陰的通道，是排出月經(jīng)血、娩出嬰兒的必經(jīng)之路，也是一個(gè)重要的性交器官。陰道壁按組織學(xué)由外到內分三層，即黏膜層、肌層和外膜。1）黏膜層由上皮和固有膜組成。上皮較厚，為復層鱗狀上皮，從基底層到表層由基底層、旁基底層、中間層和表層組成。沒(méi)有角化層。陰道粘膜的基底層呈細波紋狀起伏。2）肌層由平滑肌組織構成，肌束排列不規則，縱行和環(huán)形互相交錯。肌束間有較多的結締組織和彈性纖維。陰道外口有環(huán)形的橫紋肌稱(chēng)括約肌。3）外膜層為纖維膜，由結締組織構成，內含豐富的彈性纖維、靜脈叢、淋巴管和神經(jīng)。大鼠陰道壁成纖維細胞主要分離自外膜層，成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細胞分化而來(lái)。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動(dòng)旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著(zhù)十分重要的作用。
5.方法簡(jiǎn)介：公司實(shí)驗室分離的大鼠陰道壁成纖維細胞采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來(lái)，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測：公司實(shí)驗室分離的大鼠陰道壁成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養信息： 培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長(cháng)特性 貼壁 細胞形態(tài) 成纖維細胞樣 傳代特性 可傳3-5代左右；3代以?xún)葼顟B(tài) 培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養操作：
大鼠陰道壁成纖維細胞1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過(guò)夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過(guò)夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi)；
1. 細胞凍存時(shí)，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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